【 一般资料】 患者女性，58岁
【 主诉】 因交通事故致左上前牙缺失、牙槽突骨折合并骨缺损就诊。
【 体格检查】 颜面基本对称，张口度正常，12缺失，牙龈组织完整，但缺牙区唇侧牙槽突塌陷明显、凸凹不平（图1，2）。
【 辅助检查】 CT检查示：12缺失，唇侧牙槽骨缺失8.4 mm×1.0 mm×4.8 mm，并可见散在碎骨。
【 初步诊断】 上颌左侧牙槽突骨折伴缺损、12缺失。
【 治疗】 将治疗方案与患者及家属充分沟通，知情同意后治疗。 脂肪干细胞培养： 患者腹部切取1.5 cm×1.5 cm×0.5 cm的皮下脂肪组织，生理盐水冲洗后将脂肪抽吸获得物以等体积磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）清洗3遍，离心后吸出PBS，保留上层脂肪组织。加入0.075%的I型胶原酶，在37℃振荡条件下消化60 min。以含10%胎牛血清的基础培养基（Dulbecco’S modified eagle medium，DMEM）培养液终止消化。以1 200×g离心10 min，去上层液及脂肪，所获得细胞以生长培养液重悬，接种于直径100 mm的细胞培养皿中，放入恒温培养箱内37℃、5%CO2、100%湿度条件下常规培养，至70%～80%融合状态时以1：3的比例传代扩增细胞。传至第3代时，用β-磷酸甘油钠（10 nmol/L）、**（8~10 mol/L）、L-磷酸抗坏血酸（50μmol/L）、L-谷氨酰胺（300 mg/L）、二羟维生素D3（10 mmol/L）对细胞进形成骨诱导。 组织工程骨体外构建： 成骨诱导后的人ADSC以5×1010个/L的浓度接种于同种异体脱钙骨（杭州启迪生物科技有限公司）。支架大小为1 cm×2 cm×0.5 cm，支架孔隙率为75%±8%，平均孔径（310±54）mm。按患者术前三维CT镜像确定骨缺损的大小。体外培养3周，倒置显微镜观察细胞在脱钙骨中生长情况。细胞以荧光染料DIO荧光标记，将5μl DIO（Molecular Probes，美国）与1 ml DMEM混匀配制成染液，将细胞重悬于染液中，在37℃培养箱中静置20 min，1 500 r/min离心5 min，弃去染液。接种于脱钙骨，激光共聚焦显微镜观察细胞分布情况。 组织工程骨及种植体植入： 经过3周培养出组织工程骨。局部麻醉下按外科常规手术方法暴露骨缺损区，刮除骨碎块和肉芽组织，彻底止血，将工程骨用生理盐水冲洗并修整使其与骨缺损区吻合后，把工程骨龛入缺损区使其边缘和周围正常骨密切接触，见工程骨在缺损区稳固后严密缝合软组织封闭创面，术后应用抗生素7 d。术后定期复查CT。植骨术后5个月，在12缺牙区植入直径3.1 mm、长12 mm种植体（士卓曼，瑞士）1枚。 结果： 取自患者皮下脂肪组织的脂肪干细胞，体外生长情况良好，细胞呈长梭形（图3A）。成骨诱导后，茜素红染可见大量钙结节形成（图3B）。细胞经DIO荧光染料标记后，接种于脱钙骨；3周后可见荧光标记细胞均匀分布于孔壁（图3C）。术后1、2、4个月CT显示植骨区新生骨组织的改变区域逐渐扩大，密度逐渐增高。植骨术后5个月植骨区牙槽骨外观丰满（图4），植骨术后5个月植入种植体（图5），种植术后1年种植体与骨组织愈合良好，修复完成（图6）。组织学观察结果显示，形成的组织工程化骨具有正常的骨小梁结构，骨组织中间可见骨陷窝，骨小梁表面黏附活跃的成骨细胞（图7）。